Herpes Simplex Virus (HSV)
图1 HSV-1结构(A Handbook of Gene and Cell Therapy)
单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus,HSV)是一种有包膜的大型双链 DNA 病毒,其基因组大小范围为 150 至 240 kb,编码约90个病毒蛋白,平均直径180nm,其中包括一个125 nm的二十面体衣壳。常用HSV载体分为可复制性溶瘤载体和复制缺陷型基因治疗载体。
溶瘤HSV病毒(Oncolytic HSVs, oHSVs)是指通过基因工程改造,可选择性地在肿瘤组织内复制,进而感染并杀伤肿瘤细胞。 HSV具有感染宿主范围广、感染效率高、复制周期短、基因组容量大、致病性弱等优点。另外抗病毒药物如阿昔洛韦(acyclovir)或丙氧鸟苷(ganciclovir)有较好抑制病毒复制的作用,因此,近年来HSV-1作为溶瘤病毒产品被广泛的研究和应用。
图2 HSV-1基因组结构
HSV基因组由两个独特的长结构组成序列(长(UL)和短(Us)),它们的两侧都有一对反向的重复区TRL-IRL和IRs-TRs。UL和Us之间有一个“a”序列置于IRL和IRs之间的交界处。
劲帆医药拥有oHSVs的重组改造、拯救、扩增等技术。通过此技术,我们可以根据客户需求,设计最优路径,灵活高效地实现oHSVs突变和重组毒株的构建。例如,对常用oHSV-1病毒的ICP34.5(RL1)、ICP47、US11、TK等特定基因进行敲除,使其具有肿瘤选择性。另一方面,在特定位点插入外源基因,如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL12等增强免疫反应。为了进一步提高其肿瘤靶向性和安全性,我司可根据客户需求对HSV-1进行改造。我司拥有HSV-1毒株种类有KOS株、F株、H129株。
名称 |
株系 |
改造方式 |
T-Vec |
JS1 |
ICP34.5双拷贝缺失,并在此位点插入GM-CSF;ICP47缺失。 |
G47Δ |
F |
ICP34.5双拷贝缺失;ICP47缺失;ICP6读码框破坏并插入LACZ。 |
NV1020 |
R7020 |
ICP0,ICP4,ICP34.5单拷贝缺失,UL56缺失,TK替换成为HSV-2 TK |
rQNestin 34.5 |
F |
ICP34.5前加了nestin promoter |
M032 |
F |
ICP34.5双拷贝缺失,并在此位点表达IL-12。 |
ONCR-177 |
ONCR-159 |
ICP34.5单拷贝缺失,引入组织特异性miRNA调控ICP34.5的表达;UL37 突变;插入IL12, FLT3LG, CCL4, PD-1拮抗剂和CTLA-4。 |
C134 |
Chimeric oHSV |
ICP34.5单拷贝缺失,在UL3和UL4之间插入IRS1。 |
RP1/2 |
Clinical strain |
ICP34.5双拷贝缺失,并在此位点插入GM-CSF和GALV-GP-R;ICP47缺失。 |
Rrp450 |
Genetically engineered HSV |
ICP6缺失并插入CYP2B1 |
OH2 |
HSV-2 |
ICP34.5双拷贝缺失,并在此位点插入GM-CSF;ICP47缺失。 |
图4 使用我司改造生产的HSV病毒颗粒(产品编号:H06001)
感染BHK21细胞24小时后进行拍摄